ИГУ - «Известия Иркутского государственного университета»

«Известия Иркутского государственного университета»

Журнал ИГУ

Список выпусков > Серия «Биология. Экология» №3, 2013

Получение рекомбинантного белка NS1 вируса клещевого энцефалита

Автор(ы)
И. Г. Кондратов, И. С. Соловаров, Н. Н. Деникина, О. Г. Лопатовская, И. К. Байков, А. Л. Матвеев, Н. В. Тикунова, Г. Н. Леонова, С. И. Беликов

Аннотация

Получен рекомбинантный белок NS1 вируса клещевого энцефалита высоковирулентного штамма Софьин в бактериальной системе экспрессии E.coli B834 – pET22b. Отработаны методики очистки и рефолдинга полученного белка. Структура белка подтверждена методом пептидного фингерпринта, его иммунохимическая активность показана методами иммуно-ферментного анализа и дот-блота с моноклональными антителами. Обсуждаются преимущества ранней диагностики клещевого энцефалита на основе белка NS1 и перспективы его применения для создания вакцин.

Ключевые слова
флавивирусы, клещевой энцефалит, неструктурный белок NS1, рефолдинг, ранняя диагностика клещевого энцефалита

УДК
578.224, 578.833.2

Литература

1. Аитов К. А. Современные аспекты клиники клещевого энцефалита / К. А. Аитов [и др.] // Вопр. вирусологии. – 2007. – № 5. – С. 33–37.

2. Алексеев А. Н. Современное состояние знаний о переносчиках клещевого энцефалита / А. Н. Алексеев // Вопр. вирусологии. – 2007 – № 5. – С. 21–26.

3. Балашов Ю. С. Иксодовые клещи – паразиты и переносчики инфекций / Ю. С. Балашов. – СПб. : Наука, 1998. – 287 с.

4. Гниель Д. Ситуация по клещевому энцефалиту в мире. Вирус – возбудитель – заболевание и профилактика / Д. Гниель, М. Броекер // Клещевой энцефалит (к 65-летию открытия). – Владивосток, 2002. – С. 180–186.

5. Клещевой энцефалит в Восточной Сибири / В. И. Злобин [и др.]. – Иркутск : РИО ВСНЦ СО РАМН, 2002. – 184 с.

6. Погодина В. В. 70-летие открытия клещевого энцефалита. Путь к достоверной истории / В. В. Погодина // Вопр. вирусологии. – 2007. – № 5. – С. 5–8.

7. An antigen capture enzyme-linked immunosorbent assay reveals high levels of the dengue virus protein NS1 in the sera of infected patients / P. R. Young [et al.] / J. Clin. Microbiol. – 2000. – Vol. 38. – P. 1053–1057.

8. Enzyme-linked immunosorbent assay specific to dengue virus type 1 nonstructural protein NS1 reveals circulation of the antigen in the blood during the acute phase of disease in patients experiencing primary or secondary infections / S. Alcon [et al.] / J. Clin. Microbiol. – 2002. – Vol. 40. – P. 376–381.

9. Diagnostic accuracy of NS1 ELISA and lateral flow rapid tests for dengue sensitivity, specificity and relationship to viraemia and antibody responses / V. T. Hang [et al.] / PLoS Negl. Trop. Dis. – 2009. – Vol. 3, N 1. – e360.

10. DNA vaccines against dengue virus based on the ns1 gene: the influence of different signal sequences on the protein expression and its correlation to the immune response elicited in mice / S. M. Costa [et al.] / Virology. – 2007. – Vol. 358. – P. 413–423.

11. Evaluation and use of NS1 IgM antibody detection for acute dengue virus diagnosis: report from an outbreak investigation / S. G. Sankar [et al.] / Clin. Microbiol. Infect. – 2012. – Vol. 18, № 1. – P. E8–E10.

12. Evaluation of an enzyme immunoassay for detection of dengue virus NS1 antigen in human serum / P. Dussart [et al.] / Clin. Vaccine Immunol. – 2006. – Vol. 13. – P. 1185–1189.

13. Evaluation of dengue nonstructural protein 1 antigen strip for the rapid diagnosis of patients with dengue infection / W. Chaiyaratana [et al.] / Diagn. Microbiol. Infect. Dis. – 2009. – Vol. 1. – P. 83–84.

14. Evaluation of dengue NS1 antigen detection tests with acute sera from patients infected with dengue in Venezuela / A. H. Ramirez [et al.] / Diagn. Microbiol. Infect. Dis. – 2009. – Vol. 65. – P. 247–253.

15. High-level expression of recombinant dengue viral NS-1 protein and its potential use as a diagnostic antigen / J. L. Huang [et al.] / J. Med. Virol. – 2001. – Vol. 65. – P. 553–560.

16. Kaiser R. Tick-Borne Encephalitis / R. Kaiser // Infect. Dis. Clin. N. Am. – 2008. – Vol. 22, N 3. – P. 561–575.

17. Lindenbach B. D. Molecular biology of flaviviruses / B. D. Lindenbach, C. M. Rice / Adv. Virus Res. – 2003. – Vol. 59. – P. 23–61.

18. Schlesinger J. J. Protection of mice dengue 2 virus encephalitis by immunization with the dengue 2 virus nonstructural glycoprotein NS1 / J. J. Schlesinger, M. W. Brandriss, E. E. Walsh / J. Gen. Virol. – 1987. – Vol. 68. – P. 853–857.

19. Schlesinger J. J. The Fc portion of antibody yellow fever virus NS1 is a determinant of protection against encephalitis in mice / J. J. Schlesinger, M. Foltzer, S. Chapman / Virology. – 1993. – Vol. 192. – P. 132–141.

20. Sørensen H. P. Soluble expression of recombinant proteins in the cytoplasm of Escherichia coli / H. P. Sørensen, K. K. Mortensen / Microbial Cell Factories. – 2005. – Vol. 4. – P. 1–8.

21. Tick-borne encephalitis / T. S. Gritsun [et al.] // Antiviral Res. – 2003. – Vol. 57. – P. 129–146.

22. Timofeev A. V. Genetic vaccination of mice with plasmids encoding the NS1 non-structural protein from tick-borne encephalitis virus and dengue 2 virus / A. V. Timofeev, V. M. Butenko, J. R. Stephenson / Virus Genes. – 2004. – Vol. 28, N 1. – P. 85–97.